安益谱TQ9100三重四极杆液质联用仪测定人血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺含量的方法如下：

安益谱TQ9100三重四极杆液质联用仪

方法原理

• 净化富集：采用弱阳离子交换（WCX）固相萃取技术，特异性吸附碱性目标物，去除血浆中蛋白质、脂质等干扰基质。
• 分离检测：经反相色谱柱分离后，通过TQ9100的电喷雾离子源电离，以多反应监测（MRM）模式靶向捕获特征离子对，排除基质噪音干扰。
• 定量校正：采用同位素内标法校正基质效应与前处理损失，确保定量准确性。

仪器与试剂

• 核心仪器：安益谱TQ9100三重四极杆液相色谱串联质谱系统。
• 辅助设备：96孔WCX固相萃取板、正压固相萃取装置、氮吹浓缩仪、高速冷冻离心机、移液器、EDTA抗凝棕色采血管。
• 关键试剂：色谱纯乙腈、甲醇、甲酸；甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素、3-甲氧酪胺标准品；3-甲氧酪胺-d4、甲氧基肾上腺素-d3内标物；WCX固相萃取柱；超纯水；空白血浆。

实验步骤

• 样品采集与保存：用EDTA抗凝管采集静脉血4mL，1小时内离心（4℃，3000r/min，10min）分离血浆，血浆样品于-80℃冷冻保存。
• 样品前处理：
• 取500μL血浆样品于EP管，加入20μL内标溶液（2000pmol/L），涡旋混匀30s（2500rpm）。
• 固相萃取活化：WCX萃取板依次用200μL甲醇、200μL超纯水活化，待液体自然流干。
• 上样与淋洗：加入样品液，正压（0.2MPa）推动上样，随后用500μL超纯水、500μL乙腈依次淋洗，抽干3min。
• 洗脱与复溶：用100μL乙腈（含2%甲酸）洗脱，收集洗脱液；40℃氮吹至近干，用100μL复溶液（50%乙腈+0.1%甲酸水溶液）复溶，过0.22μm滤膜待检。
• 仪器条件设置：
• 液相色谱条件
• 质谱条件

方法验证数据

• 线性关系：各目标化合物的校正曲线均显示出良好的线性关系，相关系数（R²）均大于0.99。
• 检出限与定量限：未明确给出具体数值，但TQ9100对典型目标物的检出限可达极低水平。
• 精密度：对同一浓度水平的标准溶液进行多次重复进样分析，保留时间和峰面积的相对标准偏差（RSD）均较小。
• 准确度：各目标化合物的回收率在91.7%-106.3%之间。

实际应用场景

• 临床诊断：用于嗜铬细胞瘤等儿茶酚胺分泌肿瘤的筛查与诊断。
• 药物研发：监测药物干预后体内儿茶酚胺代谢水平变化，评估药效与安全性。
• 流行病学研究：大规模人群血浆样本筛查，分析代谢物水平与心血管疾病的关联。