三重四极杆液质联用仪-基于 TQ9120 超高效液相色谱串联质谱系统的 4 种硝基呋喃代谢物残留测定方法
一、方法原理
4 种硝基呋喃代谢物（呋喃唑酮代谢物 AOZ、呋喃它酮代谢物 AMOZ、呋喃西林代谢物 SEM、呋喃妥因代谢物 AHD）在动物组织、水产品等基质中多以结合态存在，需通过酸水解释放游离态代谢物，再与 2 - 硝基苯甲醛（2-NBA）衍生形成稳定的腙类衍生物。利用 TQ9120 超高效液相色谱系统的快速分离能力，在 C18 色谱柱上实现 4 种衍生物的高效分离，结合电喷雾离子源（ESI）与三重四极杆的多反应监测（MRM）模式，精准捕获目标衍生物的特征离子对，以内标法定量。该原理可有效消除基质干扰，满足痕量残留检测的高灵敏度与高特异性要求，符合 GB/T 21311-2007 等相关标准技术指标。
二、仪器与试剂
（一）主要仪器
- 高速冷冻离心机；
- 涡旋振荡器；
- 恒温水浴锅；
- 固相萃取装置；
- 分析天平；
- 具塞离心管；
- 固相萃取柱；
- 0.22μm 有机系微孔滤膜；
- 氮吹仪。
（二）主要试剂
三、实验步骤
（一）样品前处理
（二）仪器条件设置
（三）标准曲线绘制
（四）样品测定
按仪器条件测定待测样品溶液，根据保留时间与 MRM 离子对丰度比定性，通过基质匹配标准曲线计算样品中 4 种硝基呋喃代谢物的残留量（单位：μg/kg）。
四、方法验证
（一）线性关系
（二）检测限（LOD）与定量限（LOQ）
（三）精密度
（四）准确度
五、注意事项
- 衍生化控制：2 - 硝基苯甲醛需避光保存，衍生过程需严格控制温度与时间（如 37℃16h 确保衍生完全），避免光照导致衍生剂分解；pH 调节至 7.0±0.2，过酸或过碱会影响衍生效率。
- 基质效应消除：采用基质匹配标准曲线校正基质效应，高脂肪基质（如猪肉）可在萃取前加入 5g 无水硫酸钠除脂，或选用 MCX 固相萃取柱增强净化效果。
- 仪器维护：TQ9120 的进样口隔垫每 50 针更换 1 次，色谱柱每使用 100 针后需在 50℃、100% 甲醇条件下冲洗 30min；每月用利血平标准品进行质谱灵敏度校准，确保检测稳定性。
- 试剂与样品保存：衍生剂溶液现配现用，标准品储备液避免反复冻融；样品采集后需立即匀浆并 - 20℃冷冻保存，24h 内完成前处理，防止代谢物降解。
- 安全防护：实验中涉及盐酸、有机溶剂，需在通风橱内操作，佩戴耐酸手套与护目镜；衍生后的溶液含硝基化合物，需集中收集并按危废处理。
