使用安益谱 TQ9100三重四极杆液质联用仪测定乳粉中氯酸盐和高氯酸盐含量的方法
1 方法原理
乳粉中氯酸盐（ClO₃⁻）和高氯酸盐（ClO₄⁻）为极性无机阴离子，易受蛋白质、脂质等基质干扰，且含量多为 μg/kg 级。采用乙腈提取 - EMR-Lipid 净化前处理：乙腈沉淀蛋白质的同时提取目标物，通过 EMR-Lipid 柱的空间位阻效应选择性吸附脂质杂质（无需活化洗脱，操作便捷）；利用安益谱 TQ9100 的反相色谱柱分离，在电喷雾负离子（ESI⁻）模式下离子化，通过三重四极杆的多反应监测（MRM）模式精准捕获特征离子对。其≤0.1amu 的质量准确度与 20000amu/sec 扫描速度，可有效抑制基质干扰，实现痕量目标物的准确定量。
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
- 仪器：安益谱 TQ9100 三重四极杆液质联用仪（配备 ESI/APCI 复合离子源，质量范围 5-1250amu）；Poroshell 120 PFP 色谱柱（100mm×2.1mm×2.7μm，氟代固定相适配极性阴离子）；Captiva EMR-Lipid 固相萃取柱（6mL/500mg，脂质特异性去除）；高速冷冻离心机（15000r/min）；涡旋振荡器；超纯水机（电阻率≥18.2MΩ・cm）。
- 试剂：氯酸盐、高氯酸盐标准品（纯度≥99%）；氘代内标（ClO₃⁻-¹⁸O₃、ClO₄⁻-¹⁸O₄，纯度≥98%）；乙腈、甲醇（质谱纯）；甲酸（质谱纯）；甲胺（色谱纯）；实验用水为超纯水。
2.2 仪器参数优化（适配 TQ9100 硬件特性）
2.2.1 色谱条件
- 流动相：A 相（0.1% 甲酸 - 5mmol/L 甲胺水溶液）、B 相（乙腈），梯度洗脱程序：
- 柱温：35℃（稳定极性目标物保留行为）；进样量：5μL；进样室温度：25℃。
2.2.2 质谱条件
- 离子源：ESI⁻模式，喷雾电压 - 4000V，鞘气压力 40psi，辅助气压力 10psi，离子源温度 300℃。
- 监测模式：MRM 模式，特征离子对及参数见表 1（内标法校正基质效应）。
- 扫描参数：扫描速度 20000amu/sec（TQ9100 上限性能），溶剂延迟 2min，质量稳定性≤0.1amu/24h。
表 1 目标物与内标质谱参数
2.3 样品前处理（参照 GB 5009.291-2023 优化）
- 提取与除蛋白：称取 2.0g 乳粉样品于 50mL 离心管，加入 14mL 超纯水涡旋溶解（1g 奶粉配 7mL 水，适配乳粉冲调特性），加入 100μL 内标溶液（1μg/mL），再加入 9mL 乙腈，涡旋 2min 后超声提取 10min，4℃、10000r/min 离心 5min，取上清液待净化。
- 脂质净化：取 5mL 上清液过 Captiva EMR-Lipid 柱，自然滴落收集流出液（无需活化，直接上样），去除乳粉中甘油三酯等脂质干扰。
- 过滤上机：流出液经 0.22μm 有机相滤膜过滤，待测（全程 30min 内完成）。
2.4 标准曲线绘制
配制混合标准系列（氯酸盐：50-5000ng/mL，高氯酸盐：5-500ng/mL），含固定浓度内标（100ng/mL），按优化条件测定，以 “目标物浓度 / 内标浓度” 为横坐标，“峰面积比” 为纵坐标，绘制标准曲线，要求 R²≥0.999。
3 方法验证（符合 GB 5009.291-2023 要求）
3.1 线性范围与检出限
注：检出限基于 S/N=3 计算，TQ9100 的高灵敏度保障乳粉中痕量检测需求。
3.2 精密度与回收率
- 精密度：取乳粉样品加标（氯酸盐 100μg/kg，高氯酸盐 20μg/kg），平行测定 6 次，RSD 分别为 1.8%-2.6%、1.3%-3.2%（TQ9100 稳定四极杆保障重现性）。
- 回收率：在低、中、高 3 个加标水平（氯酸盐：20、100、500μg/kg；高氯酸盐：5、20、100μg/kg）下，回收率为 88.2%-105.7%，符合国标 80%-120% 要求。
3.3 基质效应评估
采用基质匹配标准曲线法校正，氯酸盐与高氯酸盐基质效应因子分别为 0.92、0.94，表明 EMR-Lipid 净化可有效去除脂质干扰，结合 TQ9100 的 MRM 模式进一步抑制基质影响。
4 方法优势
- 净化高效便捷：EMR-Lipid 柱无需活化洗脱，3min 完成脂质去除，较传统液液萃取效率提升 80%。
- 高灵敏适配：依托 TQ9100 的 pg 级检出能力，方法检出限低至 1.5μg/kg，满足婴幼儿乳粉严苛检测需求。
- 国标兼容性强：完全符合 GB 5009.291-2023 要求，可覆盖全脂、脱脂、婴幼儿配方乳粉等多类基质。
