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三重四极杆气质联用仪-ANYEEP TQ9100液质联用系统在人血浆变肾上腺素类物质及3-甲氧酪胺检测中的应用


变肾上腺素类物质(MNs,含甲氧基肾上腺素MN、甲氧基去甲肾上腺素NMN)作为嗜铬细胞内儿茶酚胺的代谢产物,因半衰期长、性质稳定,是嗜铬细胞瘤和副神经节瘤诊断的首选标志物。本文建立基于ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统的检测方法,实现人血浆中MN、NMN及3-甲氧酪胺(3-MT)的同时测定。通过固相萃取处理样品,优化色谱与质谱条件,经方法学验证表明,该方法线性关系良好(r²>0.996)、精密度优异(RSD%<10%)、准确度可靠(回收率91.7%-106.3%),可为临床相关疾病的筛查与诊断提供精准的检测技术支撑。

三重四极杆气质联用仪-ANYEEP TQ9100液质联用系统在人血浆变肾上腺素类物质及3-甲氧酪胺检测中的应用(图1)

安益谱TQ9100三重四极杆液质联用仪

一、研究背景与意义

儿茶酚胺(CA)是人体关键的神经递质与激素,其在COMT酶催化下生成的变肾上腺素类物质(MNs),能直接反映嗜铬细胞功能状态,在继发性高血压相关疾病的临床诊断中具有不可替代的作用。《嗜铬细胞瘤和副神经节瘤诊断治疗专家共识(2020版)》等权威指南明确推荐MNs作为相关肿瘤诊断的首选标志物,凸显了其检测的临床价值。
当前临床常用的MNs检测方法主要为高效液相色谱(HPLC)法和免疫法,但均存在明显局限:HPLC法灵敏度不足,难以满足低浓度样本的检测需求;免疫法特异性较差,易受基质干扰导致结果偏差。因此,开发一种高灵敏度、高特异性、能同时检测多种相关物质的检测方法,对提升临床诊断准确性具有重要意义。3-甲氧酪胺(3-MT)作为多巴胺的重要代谢产物,其含量变化与神经内分泌疾病密切相关,将其纳入同步检测范围,可进一步拓展检测方法的临床应用价值。基于此,本研究采用全自主研发的ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统,构建人血浆中MN、NMN及3-MT的同步检测方法。

二、实验方法与条件优化

2.1 样品前处理方法

2.2 色谱与质谱条件优化

三、方法学验证结果

3.1 分离效果与保留时间

MN、NMN及3-MT的提取离子图(见图1)显示,三种目标化合物均能实现有效分离,峰形尖锐对称,无基质干扰峰。由表3可知,MN、NMN、3-MT的保留时间分别为2.243min、2.209min、2.243min,保留时间稳定,为检测结果的可靠性提供了基础。

3.2 线性关系验证

在10-1000pg/mL浓度范围内,对三种目标化合物进行线性关系考察,采用1/x权重进行回归分析。结果显示,MN、NMN、3-MT的回归方程相关系数r²分别为0.9987、0.9984、0.9965,均大于0.996,表明三种化合物在该浓度范围内线性关系良好,能满足临床样本中不同浓度水平的检测需求。

3.3 精密度与准确度验证

通过低、中、高三个浓度水平(25pg/mL、100pg/mL、500pg/mL)的加标回收实验考察方法的精密度与准确度。精密度以相对标准偏差(RSD%)表示,准确度以回收率表示。结果显示,三种化合物各浓度水平的RSD%均小于10%(范围4.5%-9.0%),表明方法重复性优异;回收率在91.7%-106.3%之间,符合生物样本检测的准确度要求,说明该方法受基质干扰小,检测结果准确可靠。

四、讨论与结论

4.1 方法优势分析

本研究建立的基于ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统的检测方法,相比传统检测方法具有显著优势:一是采用MRM模式,结合优化的色谱与质谱参数,大幅提升了检测的灵敏度与特异性,可精准检测低至10pg/mL的目标化合物;二是实现了MN、NMN及3-MT的同时检测,简化了检测流程,提高了检测效率,为临床多指标联合诊断提供了可能;三是通过固相萃取技术优化样品前处理,有效去除基质干扰,保证了检测结果的准确性与稳定性;四是所采用的ANYEEP TQ9100系统为全自主研发,打破了国外技术垄断,具有更高的性价比与本土化服务优势。

4.2 临床应用价值

该检测方法的建立,为嗜铬细胞瘤、副神经节瘤等继发性高血压相关疾病的临床诊断提供了精准、高效的技术手段。通过检测血浆中MN、NMN的含量,可早期筛查相关肿瘤,为疾病的早期干预与治疗争取时间;同时将3-MT纳入检测范围,可辅助评估多巴胺代谢功能,为神经内分泌系统疾病的综合诊断提供更多参考依据。此外,该方法的线性范围宽、精密度高、准确度好,能满足不同临床样本的检测需求,具有良好的推广应用前景。

4.3 结论

本研究成功建立了基于ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统的人血浆中MN、NMN及3-MT同步检测方法。方法学验证结果表明,该方法线性关系良好、精密度高、准确度可靠,且检测效率高、特异性强。该方法不仅克服了传统检测方法的不足,还依托自主研发的检测设备,为临床相关疾病的诊断与筛查提供了有力的技术支撑,具有重要的临床应用价值与推广意义。

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