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ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统在脂溶性维生素检测中的应用


引言

脂溶性维生素(包括维生素A、D、E、K)是人体必需的营养素,参与视觉、骨骼健康、抗氧化及凝血等关键生理功能。

由于维生素缺乏可能导致不可逆的临床症状(如夜盲症、佝偻病、生育功能异常等),精准检测血清中脂溶性维生素水平对指导营养补充及疾病预防具有重要意义。ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统(LC-MS/MS)凭借其高灵敏度、高选择性和多反应监测(MRM)能力,成为脂溶性维生素检测的理想工具。本文详细介绍了该系统在人血清中维生素A、25-羟基维生素D2/D3、维生素E及维生素K1检测中的应用,并验证了其方法学性能。

ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统在脂溶性维生素检测中的应用(图1)

安益谱TQ9100三重四极杆液相色谱质谱联用仪


1. 方法优势

1.1 双离子源兼容性

TQ9100系统支持电喷雾离子化源(ESI)大气压化学电离源(APCI)双模式。

  • ESI模式:适用于极性较强的维生素(如维生素D代谢物),通过质子化实现高效离子化
  • APCI模式:适用于热稳定性较好的维生素(如维生素E、K1),通过气相电离减少基质干扰

1.2 多反应监测(MRM)技术

MRM模式通过筛选母离子-子离子对(如维生素A的269.1→93.1、维生素D3的401.2→365.4),实现目标化合物的高选择性定量,显著降低背景噪声,提升信噪比(S/N)

1.3 高效液相分离

采用Phenomenex Kinetex F5色谱柱(3.0mm×50mm,2.6μm),结合梯度洗脱程序(表1),在4分钟内完成5种维生素的分离,缩短了分析时间。


2. 实验方法

2.1 样品处理

  1. 取样
  2. 内标添加
  3. 沉淀蛋白
  4. 氮吹复溶

2.2 色谱条件

  • 流动相
  • 梯度程序

2.3 质谱条件

  • 离子化温度
  • 喷雾电压
  • MRM参数
    • 维生素A
    • 25OHVD3

3. 方法学验证

3.1 线性范围与回归方程

5种维生素在ESI和APCI模式下均呈现良好线性(r²>0.99),线性范围覆盖临床检测需求:

  • 维生素A:20-2000 ng/mL(ESI),40-2000 ng/mL(APCI)
  • 25OHVD2/D3:1-50 ng/mL(ESI/APCI)

3.2 精密度与准确度

  • 精密度:低浓度(线性范围下限3倍)和高浓度(线性范围上限70%)的RSD%均<10%(VK1在ESI低浓度时为17.9%)
  • 准确度:回收率在90.5%-105.6%之间,符合临床检测要求

4. 临床应用价值

4.1 特定人群营养监测

  • 孕妇与儿童:维生素D缺乏可能导致胎儿骨骼发育异常,定期检测可指导补充剂量
  • 老年人:维生素K缺乏与骨质疏松相关,检测结果可辅助预防骨折风险

4.2 疾病相关检测

  • 脂肪吸收障碍患者:维生素E缺乏可能加重氧化应激损伤,检测结果可评估病情严重程度

5. 结论

ANYEEP TQ9100液相色谱串联质谱系统通过双离子源兼容性、MRM高选择性检测及高效液相分离技术,实现了人血清中5种脂溶性维生素的快速、精准检测。该方法具有线性范围宽、精密度高、准确度好的特点,适用于临床营养监测及疾病辅助诊断,为个性化维生素补充提供了科学依据。未来可进一步优化自动化样品处理流程,提升检测通量。


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