检测目标

• 诺氟沙星（Norfloxacin）
• 氧氟沙星（Ofloxacin）
• 左氧氟沙星（Levofloxacin）
• 环丙沙星（Ciprofloxacin）
• 洛美沙星（Lomefloxacin）
• 氟罗沙星（Fluoroquinolone）
• 司帕沙星（Sparfloxacin）
• 莫西沙星（Moxifloxacin）

仪器条件

安益谱SQ910单四极杆液相色谱质谱联用仪

液相色谱条件

• 色谱柱：C18 反相色谱柱
• 流动相：
• 流动相 A：0.1% 甲酸水溶液
• 流动相 B：0.1% 甲酸乙腈溶液
• 流速：0.5 mL/min
• 柱温：30°C
• 进样量：10 µL
• 梯度洗脱程序：

质谱条件

定量分析

• 使用外标法进行定量分析，用已知浓度的标准溶液绘制校准曲线，相关系数应≥0.995。

方法验证

检出限（LOD）

• 通过信噪比（S/N）=3 确定检出限，8 种喹诺酮类药物的检出限均在 0.01 - 0.1µg/L 之间。
• 8 种喹诺酮在 1.0 - 50.0μg/kg 范围内线性关系良好，检出限（LOD，S/N=3）为 0.2 - 0.8μg/kg

精密度

• 重复性：在同一实验室内，由同一操作者使用同一设备在短时间内对同一样品进行多次重复测定，相对标准偏差（RSD）应≤10%
• 中间精密度：在不同时间、不同操作者、不同设备上对同一样品进行测定，RSD 应≤15%
• 空白样品加标（2.0、10.0、50.0μg/kg）的日内精密度 RSD≤4.8%，日间精密度 RSD≤6.2%

回收率

• 通过加标回收实验验证回收率，一般应在 70% - 120% 之间，RSD 应≤10%。
• 空白样品加标（2.0、10.0、50.0μg/kg）回收率为 92.3% - 108.5%。

样品前处理

• 提取：将样品（如尿液、血浆、水产品等）用乙腈沉淀蛋白，离心后取上清液。若检测水产品，称取 2.0g 匀浆样品，加入 10mL 乙腈 - 乙酸 - 水（79:1:20，V/V/V），振荡 1min 后超声提取 10min，加入 2.0g NaCl 盐析，-20℃冷冻 30min 除脂肪
• 净化：通过固相萃取柱（如 C18 柱）进行净化，洗脱后浓缩至近干，用流动相定容。检测水产品时，8000r/min 离心 10min 后取 1mL 上清液过 150mg C18 净化柱，收集流出液；取 0.5mL 净化液与 0.5mL 0.1% 甲酸溶液混匀，过 0.22μm 尼龙滤膜。

注意事项

• 样品保存：采集的样品应尽快分析，避免喹诺酮类药物的降解。
• 仪器校准：定期校准仪器，确保检测结果的准确性。
• 环境条件：在稳定的环境条件下使用设备，避免温度和湿度的剧烈变化。
• 安全操作：在操作过程中注意安全，避免接触有害溶剂和试剂。
• 基质效应控制：采用基质匹配标准曲线校正，结合 SQ910 的高离子传输效率，基质抑制率控制在 ±10% 以内。
• 基质干扰消除：若检测畜禽肉基质，可在提取后增加乙二胺 - N - 丙基硅烷（PSA）吸附步骤（50mg PSA/1mL 提取液），去除脂肪酸与色素干扰。
• 仪器维护技巧：每批样品检测后，用甲醇 - 水（1:1）冲洗色谱柱 30min，离子源每周拆解清洁，通过 IntelliStart™技术自动校准质量轴（24h 稳定性 ±0.05u）
• 快速筛查模式：启用仪器扫描速度，结合母离子扫描 - 子离子确认（PI-SIM）模式，15min 内完成单样品 8 种喹诺酮的筛查与确证。