三重四极杆气相色谱质谱联用仪-Anyeep TQ8100三重四极杆气质联用仪检测食品中N-亚硝胺类
一、方法概述
本方法针对食品中 N - 亚硝胺类化合物（如 N - 二甲基亚硝胺 NDMA、N - 二乙基亚硝胺 NDEA 等）的痕量（μg/kg 级）检测需求，利用 Anyeep TQ8100 三重四极杆 GC-MS 的 MRM 模式高特异性、抗基质干扰能力及低检出限优势，通过优化基质适配型前处理与仪器参数，实现肉制品、乳制品、饮用水等多类食品中 8 种常见 N - 亚硝胺的准确定量，符合 GB 5009.26-2023《食品安全国家标准 食品中 N - 亚硝胺类化合物的测定》要求。
二、实验部分
（一）仪器与试剂
- 仪器：Anyeep TQ8100 三重四极杆 GC-MS，超声波提取仪，高速离心机（12000r/min），固相萃取（SPE）装置，氮吹仪，0.22μm 有机相滤膜。
- 试剂：
- 标准品：NDMA、NDEA、N - 二丙基亚硝胺 NDPA、N - 亚硝基吡咯烷 NPYR、N - 亚硝基哌啶 NPIP 等 8 种 N - 亚硝胺（纯度＞98%）
- 内标物：氘代 N - 亚硝胺混合标样（d₆-NDMA、d₁₀-NDEA，纯度＞98%）
- 提取剂：二氯甲烷（色谱纯）、乙酸乙酯（色谱纯）、0.1% 甲酸水溶液（分析纯）
- 净化试剂：SPE 小柱（C18 柱，500mg/6mL；NH₂柱，500mg/6mL）
- 载气：高纯氦气
（二）样品前处理优化（分基质适配）
1. 高基质复杂性样品（如腊肉、香肠等肉制品）
- 提取：称取 5.00g 均质样品→加入 10μL 内标液（10μg/L）→加入 15mL 0.1% 甲酸水溶液→涡旋 2min→超声提取 15min（40℃）→加入 10mL 二氯甲烷→涡旋 3min→离心 10min（8000r/min）→收集下层有机相。
- 净化：
- SPE 柱活化：C18 柱依次用 5mL 甲醇、5mL 水活化；
- 上样：取 5mL 有机相浓缩至 1mL→上样至 C18 柱→流速 1 滴 /s；
- 淋洗与洗脱：用 3mL 5% 甲醇水溶液淋洗→弃去淋洗液→用 5mL 乙酸乙酯洗脱→收集洗脱液；
- 浓缩定容：洗脱液氮吹至近干→用甲醇定容至 1.0mL→过 0.22μm 滤膜→待测。
2. 低基质干扰样品（如饮用水、纯牛奶）
- 提取（饮用水）：量取 100mL 水样→加入 10μL 内标液→加入 20mL 二氯甲烷→振荡萃取 20min→离心 5min→收集有机相→重复萃取 2 次→合并有机相。
- 净化（牛奶）：称取 10.00g 牛奶→加入 5mL 乙腈沉淀蛋白→涡旋 1min→离心 10min→取上清液→后续同饮用水 SPE 净化步骤。
三、关键优化要点
- 基质干扰控制：肉制品采用 “C18+NH₂” 双 SPE 柱净化，去除脂肪与蛋白质，避免离子源污染；
- MRM 参数调试：通过 Anyeep TQ8100 的 “自动优化功能” 筛选最佳子离子与碰撞能量，NDMA 定量子离子响应值提升 30%；
- 挥发损失防控：前处理全程低温、密闭操作，NDMA 回收率从 75% 提升至 92%；
- 仪器维护：每周用 200μg/L 标样验证 MRM 响应稳定性，每月 300℃烘烤离子源 30min，清除基质残留。
