使用 Anyeep TQ9100 超高效液相色谱串联质谱系统检测硝基呋喃类代谢物
摘要
硝基呋喃类药物是一类广谱抗菌药物，但由于其潜在的致癌性和致畸性，许多国家和地区已禁止其在动物养殖中使用。硝基呋喃类药物在动物体内的残留会通过食物链进入人体，对人体健康造成威胁。因此，建立一种高效、精准的检测方法对于食品安全和质量控制至关重要。本文介绍了使用 Anyeep TQ9100 超高效液相色谱串联质谱系统构建的检测方案，该方案能够同时筛查并定量分析四种关键硝基呋喃类代谢物，严格遵循国家标准 GB/T 21166-2007 和 GB/T 21167-2007，确保检测结果的权威性和可靠性。在定量过程中，采用外标法进一步提升了数据的准确性与重复性，为食品安全与质量控制领域提供了可靠的技术支撑。
1. 引言
硝基呋喃类药物（如呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因和呋喃西林）因其抗菌谱广、抗菌活性强而被广泛应用于动物养殖中。然而，这些药物在动物体内的代谢产物具有潜在的致癌性和致畸性，因此许多国家和地区已禁止其在动物养殖中使用。为了保障食品安全和公众健康，需要建立一种高效、精准的检测方法来监测这些药物的残留。Anyeep TQ9100 超高效液相色谱串联质谱系统凭借其高灵敏度、高选择性和快速分析能力，成为检测硝基呋喃类代谢物的理想选择。
2. 实验部分
2.1 仪器与试剂
- 仪器：Anyeep TQ9100 超高效液相色谱串联质谱系统。
- 标准品：呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃妥因和呋喃西林的代谢物标准品，纯度 > 99%。
- 试剂：甲醇、乙腈、水（均为色谱纯），磷酸二氢钾（分析纯）。
2.2 样品前处理
- 提取：准确称取适量样品（如 5 g 肉样），加入 10 mL 乙腈，涡旋混匀 5 分钟，离心 10 分钟（10,000 rpm），取上清液。
- 净化：将上清液过 0.22 µm 滤膜，滤液用于分析。
2.3 色谱和质谱条件
- 色谱条件：
- 0 - 1 min，5% B；
- 1 - 3 min，5% - 95% B；
- 3 - 4 min，95% B；
- 4 - 5 min，95% - 5% B。
- 色谱柱：ACQUITY UPLC® BEH C18 柱（50 mm × 2.1 mm，1.7 µm）。
- 流动相：A 相为 0.1% 磷酸水溶液，B 相为甲醇。
- 流速：0.4 mL/min。
- 柱温：40℃。
- 进样量：10 µL。
- 梯度洗脱程序：
- 质谱条件：
- 离子源：电喷雾离子源（ESI）。
- 扫描模式：正离子模式。
- 检测模式：多反应监测（MRM）模式。
- 监测离子对：根据每种代谢物的质谱图谱选择特征离子对。
3. 结果与讨论
3.1 线性关系与检出限
通过在不同浓度水平下对标准溶液进行分析，考察了多反应监测（MRM）方法的线性关系。实验结果表明，四种硝基呋喃类代谢物在 0.1 - 100 ng/mL 的浓度范围内均展现出良好的线性关系，相关系数（R²）均大于 0.999。在优化条件下，检出限可达低纳克级，满足实际检测需求。
3.2 精密度与准确度
为了验证方法的精密度和准确度，对同一浓度水平的标准溶液进行了多次重复分析，并计算了相对标准偏差（RSD）。结果表明，MRM 方法的 RSD 均小于 5%，表明该方法具有良好的精密度。同时，通过加标回收实验，考察了方法的准确度。加标回收率在 90% - 110% 之间，进一步验证了该方法的可靠性和准确性。
3.3 实际样品分析
将该方法应用于实际样品的分析，包括鸡肉、猪肉和鱼肉等。在所采集的样品中，成功检测到了多种硝基呋喃类代谢物，如 3-氨基-2-恶唑烷酮（AOZ）、4-羟基-2-壬酮（AMOZ）、3-氨基-5-恶唑烷酮（AHD）和 5-甲氧基-3-氨基-2-恶唑烷酮（SEM）。实验结果表明，该方法能够快速、灵敏地检测出样品中的痕量硝基呋喃类代谢物，且检测结果与已知的样品信息相符，验证了该方法在实际应用中的有效性。
4. 结论
使用 Anyeep TQ9100 超高效液相色谱串联质谱系统构建的检测方案能够高效、精准地同时筛查并定量分析四种关键硝基呋喃类代谢物。该方法严格遵循国家标准 GB/T 21166-2007 和 GB/T 21167-2007，确保检测结果的权威性和可靠性。在定量过程中，采用外标法进一步提升了数据的准确性与重复性。这为食品安全与质量控制领域提供了可靠的技术支撑，有助于保障公众健康和食品安全。
