安益谱 TQ9100 液相色谱串联质谱系统在人血浆中变肾上腺素类物质及 3-甲氧酪胺含量测定中的应用
一、引言
变肾上腺素类物质(如肾上腺素、去甲肾上腺素等)和 3-甲氧酪胺是人体重要的神经递质及其代谢产物,其在人血浆中的含量测定对于生理功能研究、疾病诊断以及药物疗效评估具有重要意义。ANYEEP TQ9100 液相色谱串联质谱系统凭借其高灵敏度、高选择性和高精度的检测能力,为这些生物胺类物质的准确定量提供了一种可靠的方法。
二、仪器配置与测试条件
(一)仪器配置
- 液相色谱系统:配备高效液相色谱泵、自动进样器和柱温箱。
- 质谱系统:ANYEEP TQ9100 三重四极杆质谱仪,配备电喷雾离子源(ESI)。
- 色谱柱:适合分析生物胺类物质的 C18 反相色谱柱。
- 流动相:优化的水相和有机相溶剂,含适量酸或缓冲盐以改善分离效果。
- 计算机与软件:用于数据采集、处理和分析的专业软件。
(二)测试条件
- 液相色谱条件:
- 流速:0.3 mL/min。
- 柱温:35℃。
- 进样量:10 µL。
- 梯度洗脱程序:根据目标化合物的极性,设计合适的梯度洗脱程序以实现有效分离。
- 质谱条件:
- 离子源温度:350℃。
- 传输线温度:300℃。
- 扫描模式:多反应监测(MRM)模式,针对每种目标化合物选择特定的母离子和子离子对进行监测。
- 电离模式:正离子模式。
三、测试方法
(一)样品前处理
人血浆样品需经过适当的前处理以去除蛋白质、杂质,并富集目标化合物。通常采用蛋白质沉淀法,加入适量的甲醇或乙腈使蛋白质沉淀,离心后取上清液进行分析。也可采用固相萃取法进一步净化和富集样品。
(二)定性与定量分析
- 定性分析:通过与标准品的保留时间和特征离子对进行比对,对目标化合物进行定性鉴定。
- 定量分析:采用外标法进行定量,以标准品的浓度和对应的峰面积建立校准曲线,根据样品中目标化合物的峰面积计算其含量。
(三)校准与质量控制
- 校准曲线:配置一系列不同浓度的标准溶液,进样分析后以峰面积对浓度作图,得到线性回归方程。
- 质量控制:在样品分析过程中,定期插入质量控制样品以监测仪器的稳定性和方法的准确性。
四、测试结果与分析
(一)校正曲线
各目标化合物的校正曲线均显示出良好的线性关系,相关系数(R²)均大于 0.99,表明在测试浓度范围内仪器对这些化合物的响应具有良好的线性。
(二)重复性测试
对同一浓度水平的标准溶液进行多次重复进样分析,计算目标化合物的保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)。结果表明,保留时间的 RSD 均小于 0.5%,峰面积的 RSD 均小于 5%,说明仪器具有良好的重复性和稳定性。
(三)灵敏度与检出限
TQ9100 系统对变肾上腺素类物质和 3-甲氧酪胺展现出高灵敏度,检出限低至 pg/mL 级别。以信噪比(S/N)=3 计算方法检出限,各目标化合物的检出限均满足实际样品检测要求,能准确测定人血浆中低浓度的目标化合物。
(四)实际样品测定
将该方法应用于人血浆样品的测定,成功检测到变肾上腺素类物质和 3-甲氧酪胺的存在。通过与标准曲线对比,准确计算出样品中各目标化合物的含量,为生理功能研究和临床诊断提供了有价值的数据。
五、结论
ANYEEP TQ9100 液相色谱串联质谱系统在人血浆中变肾上腺素类物质及 3-甲氧酪胺含量的测定中表现出色。其高灵敏度、高选择性和高精度的检测能力,结合优化的液相色谱和质谱条件,实现了对这些生物胺类物质的准确定量分析。该方法具有良好的线性、重复性和灵敏度,适用于人血浆样品的常规检测和研究分析,为相关领域的研究提供了有力的技术支持。