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使用 Anyeep TQ9120测定中药材中59种植物生长调节剂的方法


本文利用安益谱公司 Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统,建立了一种检测红参中多种植物生长调节剂含量的方法。该方法线性良好,检测限定量限满足2025版《中国药典》要求。利用本方法和设备可实现对中药药材中多种植物生长调节剂的检出和定量。

使用 Anyeep TQ9120测定中药材中59种植物生长调节剂的方法(图1)

2025年版《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)自2025年10月1日起正式施行。本版《中国药典》首次采纳液相色谱串联质谱法检测植物生长调节剂残留量的方法。

本文按照2025版《中国药典》四部《2342植物生长调节剂残留量测定法第一法59种植物生长调节剂》的相关要求,开发了检测红参中59种植物生产调节剂残留量的液相色谱串联质谱法,该方法灵敏度高、线性良好、精密度和准确度等方法学参数均满足《药典》的相关要求。

仪器与试剂

Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统

乙腈,甲醇(质谱纯,美国 ThermoFisher 公司)

甲酸铵(分析纯,德国 Merck 公司)

标准品及内标(上海安谱)

dSPE 净化盐包(上海安谱,SBEQ-CA8010-BZ)

dSPE 净化管(上海安谱,SBEQ-CA8915-25)

液相条件

流动相A:10mM 甲酸铵,0.05%甲酸,水

流动相B:0.05%甲酸,甲醇

色谱柱:Waters Acquity UPLC BEH C18,1.7 μm,2.1×100 mm

柱温:35 ℃

流速:0.3 mL/min

进样量:5 μL

质谱条件

离子化源: 电喷雾离子化源(ESI)

源温度: 550 ℃

喷雾电压: +5000 V,-4500 V

气帘气: 35 psi

雾化气: 55 psi

辅助气: 70 psi

碰撞气: 11

扫描模式: dMRM

使用 Anyeep TQ9120测定中药材中59种植物生长调节剂的方法(图2)

样本处理

样品处理:取红参数片,粉碎成粉末(过三号筛),精密称量3.0 g,置50 mL聚苯乙烯具塞离心管中,加水10.0 mL,涡旋震荡使药粉充分浸润,放置30分钟。加入乙腈15.0 mL与内标溶液100 μL,涡旋使混匀,置振荡器上剧烈振荡(500 rpm)5分钟。加入dSPE 净化盐包(无水硫酸镁、氯化钠、枸橼酸三钠和枸橼酸氢二钠的混合粉末4:1:1:0.5)6.5 g,立即摇散,再剧烈振荡(500 rpm)3分钟,于冰浴中冷却10分钟。4000 rpm离心5分钟,精密吸取上清液9.0 mL,置dSPE 净化管(含无水硫酸镁900 mg、十八烷基硅烷键合硅胶C18 450 mg、硅胶Silica 100 mg、石墨化炭黑GCB 45 mg)中,涡旋使充分混匀,再剧烈振荡(500 rpm)5分钟,4000 rpm离心5分钟。吸取上清液1.0 mL,用微孔滤膜(0.22 μm)过滤,取续滤液,即得。

基质混合对照品工作溶液:取红参6份,按“样品处理”过程至“吸取上清液1.0 mL”的前一步,分别吸取上清液800 μL至980 μL不等,每份中分别加入混合对照品溶液(100 μg/L)50 μL、100 μL,混合对照品溶液(1000μg/L)20 μL、50 μL、100 μL、200 μL(终体积为1000 μL),涡旋混匀,用微孔滤膜(0.22 μm)滤过,取续滤液。最终配置为浓度分别为1、2、5、10、20、50、100和200 μg/L的系列基质混合对照品工作溶液。
回收率样本:取红参1份,粉碎成粉末(过三号筛),精密称量3.0 g,加入5 mg/L混合标准品120 μL,按“样品处理”方法进行处理,最终制备成含0.2 mg/kg 待测物的回收率样本。平行制备6组样本。

总结

本文建立了Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统分析中红参59种植物生长调节剂的方法。从结果可见,该方法具备优异的灵敏度、稳定性和线性范围,相关指标符合标准要求,可用于中药材中植物生长调节剂的常规分析检测。