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三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血清中脂溶性维生素含量方法


本文利用安益谱公司 Anyeep TQ9100超高效液相色谱串联质谱系统,建立了一种同时检测人血清中5种脂溶性维生素的方法。该方法线性良好,定量限满足相关标准要求。利用本方法和设备可实现对脂溶性维生素的检测和定量。

三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血清中脂溶性维生素含量方法(图1)

维生素缺乏大多属于进行性疾病,临床表现不明显,但若长期亚临床缺乏或不足则会产生特征性的临床表现,如维生素A缺乏容易导致夜盲症,维生素D缺乏会影响骨骼发育,维生素E缺乏容易造成生育功能异常,维生素K缺乏会影响凝血功能等。临床开展系统的维生素检测项目能准确地反映人体维生素的需求,指导维生素营养补充,特别适合对特定人群的营养监测。

本方法利用 Anyeep TQ9100液相色谱串联质谱系统检测人血清中的维生素A(VA)、25-羟基维生素D2(25OHVD2)、25-羟基维生素D3(25OHVD3)、维生素E(VE)和维生素K1(VK1),同时支持 ESI 源和 APCI 源,无需切换离子化源或变更色谱条件即可进行检测。

仪器与试剂

Anyeep TQ9100超高效液相色谱串联质谱系统

甲醇(质谱纯,美国 Thermo Fisher 公司)

水(超纯水)

甲酸(德国默克公司)

液相条件

流动相A:0.1%甲酸,水

流动相B:0.1%甲酸,甲醇

色谱柱:Phenomenex Kinetex F5 Column 3.0 mm×50 mm 2.6 μm

柱温:40 ℃

流速:0.3 mL/min

进样量:10 μL

质谱条件

ESI

离子化源: 电喷雾离子化源(ESI+)

源温度: 500 ℃

喷雾电压: 5000 V

气帘气: 20 psi

雾化气: 50 psi

辅助气: 55 psi

碰撞气: 2

扫描模式: MRM

APCI

离子化源: 电喷雾离子化源(APCI+)

源温度: 500 ℃

喷雾电压: 5000 V

气帘气: 20 psi

雾化气: 50 psi

碰撞气: 2

扫描模式: MRM

三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血清中脂溶性维生素含量方法(图2)

样本处理

取待测样本200 μL于1.5 mL EP 管中,加入内标溶液20 μL,再加入异丙醇400 μL;涡旋混匀(2500 rpm,5 min)并离心(4 ℃,14000 rpm,5 min);取上清液500 μL于96孔板中,40 ℃氮吹至干;在吹干的96孔板中加入100 μL复溶液(50%乙腈),置于微孔板震荡仪上2000 rpm/min 震摇2 min,4000 rpm 离心5 min,待进样。

总结

本方法使用安益谱全自主研发生产的 TQ 9100三重四极杆串联质谱系统,实现了血清中脂溶性维生素A、D、E、K的同时检测,该方法线性好、准确度高,可兼容 ESI 源和 APCI 源,方便不切换源使用。