三重四极杆液相色谱-使用 Anyeep TQ9120测定牛奶中氯霉素残留量的方法
本文利用安益谱公司 Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统，建立了一种检测牛奶中氯霉素残留量的方法。该方法线性良好，检测限定量限满足相关标准要求。利用本方法和设备可实现对牛奶中氯霉素的检出和定量。
氯霉素是由氯链丝菌产生的一种具有抑制细菌生长作用的广谱抗菌素，但该药对人类的毒性较大，抑制骨髓造血功能造成过敏反应，引起再生障碍性贫血，长期大量食用氯霉素残留的动物性食品可能引起肠道菌群失调及抑制抗体的形成。
本文按照《GB29688-2013 食品安全国家标准 牛奶中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》的相关要求，开发了牛奶中氯霉素残留量测定的液相色谱-串联质谱法，该方法灵敏度高、线性良好、精密度和回收率等方法学参数均满足标准的相关要求。仪器与试剂
Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统
乙腈，甲醇（质谱纯，美国 ThermoFisher 公司）
甲酸（质谱纯，德国CNW公司）
乙酸乙酯、正己烷（色谱纯，德国 CNW 公司）
氯化钠（分析纯，上海安谱）
氯霉素标准品和内标品（上海安谱）
C18固相萃取小柱（SBEQ-CA0853，上海安谱）液相条件
流动相A：水
流动相B：乙腈
色谱柱：CNW Athena UHPLC C18，2.1 mm×100 mm，1.8 μm
柱温：40 ℃
流速：0.3 mL/min
进样量：10 μL质谱条件
离子化源： 电喷雾离子化源（ESI-）
源温度： 550 ℃
喷雾电压： -4500 V
气帘气： 35 psi
雾化气： 50 psi
辅助气： 70 psi
碰撞气： 8
扫描模式： MRM
样本处理
样本处理：称取试样10.0 g，精确到0.05 g，于50 mL 离心管中，加入20 ng/mL 氯霉素内标工作溶液250 μL，加乙酸乙酯20 mL，振荡15 min，6000 rpm 离心10 min，取乙酸乙酯层于梨形瓶中，残渣加入乙酸乙酯20 mL 重复提取一次，合并两次提取液。
45 ℃水浴旋转蒸发至干。用4%氯化钠溶液5 mL 溶解残渣，加正己烷5 mL，振荡1 min，静置待分层。弃正己烷，再加正己烷5 mL 重复提取一次，取下层液备用。
C18固相萃取小柱依次用甲醇5 mL，水5 mL 活化，取试液过柱。控制流速为每3-4秒一滴，用水5 mL 淋洗，抽干，5 mL 甲醇洗脱。洗脱液50 ℃氮气吹干，用50%乙腈溶液1.0 mL 复溶，过0.22 μm滤膜，待进样。
标准曲线：用50%乙腈溶液稀释氯霉素标准品和氯霉素内标品，配置成内标浓度为10 g/mL 以及氯霉素浓度为0.02、0.05、0.10、0.25、0.50、1.0、2.0和5.0 ng/mL 的系列标准溶液。
回收率样本：在试样中添加一定含量的氯霉素标准品，按“样本处理”进行处理操作，最终配置成含量为0.01、0.02、0.05、0.10 μg/kg氯霉素的回收率样本。每个浓度各制备6个平行。
线性范围
精密度和回收率
总结
