三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用 Anyeep TQ9120测定水产品中红霉素残留量的方法
本文利用安益谱公司 Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统，建立了一种检测水产品中红霉素残留量的方法。该方法线性良好，检测限定量限满足相关标准要求。利用本方法和设备可实现对水产品中红霉素的检出和定量。
红霉素是由链霉菌 Streptomyces erythreus 所产生的一种碱性抗生素，属大环内酯类，对革兰阳性菌有较强的抑制作用，对革兰氏阴性菌也有一定的抑制作用。《GB 31650-2019 食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》明确规定了红霉素在不同可食用组织中的残留限量为40-200 μg/kg。
本文按照《GB 29684-2013 食品安全国家标准 水产品中红霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》的相关要求，开发了鱼肉中红霉素残留量测定的液相色谱-串联质谱法，该方法灵敏度高、线性良好、精密度和回收率等方法学参数均满足标准相关要求。仪器与试剂
Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统
乙腈，甲醇（质谱纯，美国 ThermoFisher 公司）
甲酸（质谱纯，德国CNW公司）
正己烷、乙酸（色谱纯，德国 CNW 公司）
氯化钠、十二水磷酸氢二钠、磷酸（分析纯，上海安谱）
红霉素标准品和内标品（上海安谱）
HLB 固相萃取小柱（SBEQ-CA6654，上海安谱）液相条件
流动相A：0.1%甲酸，水
流动相B：甲醇
色谱柱：Waters Acquity UPLC BEH C18，1.7μm，2.1×100 mm
柱温：40 ℃
流速：0.3 mL/min
进样量：5 μL质谱条件
离子化源： 电喷雾离子化源（ESI+）
源温度： 350 ℃
喷雾电压： 5000 V
气帘气： 35 psi
雾化气： 50 psi
辅助气： 70 psi
碰撞气： 8
扫描模式： MRM
样本处理
样本处理：称取试样5.0 g，精确到0.05 g，于50 mL 离心管中，加入200 ng/mL 红霉素内标工作溶液50 μL，加乙腈15 mL，搅拌，超声5 min，振荡5 min，4000 rpm 离心10 min，取上清液于另一离心管中，残渣加入乙腈5 mL 重复提取一次，合并两次上清液。加氯化钠2 g和正己烷15 mL，振荡5 min，4000 rpm 离心10 min，弃上层正己烷，取下层液体于100 mL 梨形瓶中，40 ℃旋转蒸发至干，用0.1 M pH = 8.0的磷酸盐缓冲液5 mL溶解残渣，加正己烷5 mL，混合1 min，转移至离心管中，6000 rpm 离心5 min，弃去正己烷，再加正己烷重复操作一次，取下层溶液过 HLB 固相萃取小柱。
HLB 小柱依次用甲醇5 mL，水5 mL 和磷酸盐缓冲液5 mL 活化，取试液过柱。用磷酸盐缓冲液5 mL 洗涤离心管后过柱。流干后，依次用水5 mL 和40%甲醇溶液5 mL 淋洗，抽干，8 mL 甲醇洗脱。洗脱液40 ℃旋蒸蒸发至干，用30%甲醇溶液1.0 mL 复溶，过0.22 μm滤膜，待进样。
标准曲线：用30%甲醇溶液稀释红霉素标准品和红霉素内标品，配置成内标浓度为10 g/mL 以及红霉素浓度为0.1、0.2、0.5、1、5、10、25、50、100和500 ng/mL 的系列标准溶液。
回收率样本：在试样中添加一定含量的红霉素标准品，按“样本处理”进行处理操作，最终配置成含量为1、10、100 μg/kg红霉素的回收率样本。每个浓度各制备6个平行。
线性范围
精密度和回收率
总结
