三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用 Anyeep TQ9120测定猪肉中18种β-受体激动剂的方法
本文利用安益谱公司 Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统，建立了一种同时检测猪肉中18种β-受体激动剂药物的方法。该方法线性良好，检测限定量限满足相关标准要求。利用本方法和设备可实现对β-受体激动剂药物的检出和定量。
瘦肉精是一类药物的统称，任何能够抑制动物脂肪生成，促进瘦肉生长的物质都可以称为“瘦肉精”。能够实现此类功能的物质主要是一类叫做β-受体激动剂的药物。这类药物进入牲畜体内后能够改变代谢途径，促进动物肌肉生长。近年来，因食用被“瘦肉精”污染的食物导致中毒事件屡有发生，且后果极其严重，引起了世界各国的高度重视。2021年3月19日，农业农村部办公厅印发《关于开展“瘦肉精”专项整治行动的通知》，部署在全国范围，开展为期三个月的“瘦肉精”专项整治行动，严厉打击违禁使用“瘦肉精”的行为。日常检测涉及动物源性食品和饲料等，涉及的标准包括 GB/T 21313-2007 、GB/T 22286-2008 、 GB/T 22147-2008 、SN/T 1924-2011 、 NY/T 3144 -2017 、 NY/T 3145-2017 、 NY/T 3146-2017 、农业部1025号公告-11/18/6 -2008 、农业部1029号公告-1-2011 。本方法参考自 GB 31658.22-2022 ，采用内标法定量。
仪器与试剂
Anyeep TQ9120超高效液相色谱串联质谱系统
乙腈，甲醇（质谱纯，美国 ThermoFisher 公司）
甲酸（质谱纯，德国CNW公司）
高氯酸（德国CNW公司）
氨水（德国CNW公司）
乙酸乙酯（色谱纯，德国CNW公司）
叔丁基甲醚（色谱纯，德国CNW公司）液相条件
流动相A：0.1%甲酸，水
流动相B：0.1%甲酸，乙腈
色谱柱：Phenomenex Kinetex, F5, 100 Å, 2.6 µm, 3×100 mm
柱温：40 ℃
流速：0.4 mL/min
进样量：5 μL质谱条件
离子化源： 电喷雾离子化源（ESI+）
源温度： 550 ℃
喷雾电压： 5000 V
气帘气： 30 psi
雾化气： 50 psi
辅助气： 70 psi
碰撞气： 8
扫描模式： DMRM
样本处理
样本处理 称取试料2 g于50 mL 离心管内，加0.2 mol/L乙酸铵缓冲溶液6 mL、β葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶40 μL,涡旋混匀，37℃避光水浴振荡16 h，放置至室温，备用。
取备用液，加100 ng/mL 内标工作液100 μL，涡旋混匀，8000 r/min 离心8 min,取上清液，加0.1 mol/L高氯酸溶液5 mL，涡旋混匀，用高氯酸调 pH 至1.0±0.2，8000 r/min 离心8 min 后，将上清液用10 mol/L NaOH 溶液调 pH 至10±0.5。加乙酸乙酯15 mL，中速振荡5 min，5000 r/min 离心5 min，取上层有机相；下层水相中再加入叔丁基甲醚10 mL，中速振荡5 min，5000 r/min 离心5 min，取上层有机相合并，50 ℃下氮气吹干，用2%甲酸溶液5 mL 溶解，备用。
取混合型阳离子交换固相率取柱，依次用甲醇、2%甲酸溶液各3 mL 活化，取备用液过柱，依次用2%甲酸溶液、甲醇各3 mL 淋流，抽干，用5%氨化甲醇溶液3 mL 洗脱，洗脱液在50 ℃下氮气吹干。
残余物中加入甲醇-0.1%甲酸溶液0.5 mL 充分溶解，过0.22 μm微孔滤膜，供液相色谱串联质谱仪测定。
标准曲线制备 精密量取混合标准工作液、混合内标工作液适量，用甲醇-0.1%甲酸溶液稀释成浓度为 0.05-50 ng/mL 范围内的系列标准工作液，含内标均为20 ng/mL，供液相色谱串联质谱法测定。
总结
