©2022 安益谱精密仪器. All Rights Reserved.

三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺含量


本文利用安益谱公司 Anyeep TQ9100超高效液相色谱串联质谱系统,建立了一种同时检测人血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺含量的方法。该方法线性良好,定量限满足相关标准要求。利用本方法和设备可实现对这三种儿茶酚胺类物质的检测和定量。

三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺含量(图1)

安益谱TQ9100三重四极杆液相色谱质谱联用仪

儿茶酚胺(Catecholamine, CA)是人体重要的神经递质和激素,其在嗜铬细胞内的儿茶酚-O-甲基转移酶的催化作用下代谢成变肾上腺素类物质(Metanephrines, MNs),包含甲氧基肾上腺素(Metanephrine, MN)和甲氧基去甲肾上腺素(Normetanephrines, NMN)。由于 MNs 较 CA 的半衰期长,性质稳定且能直接反映嗜铬细胞的状态,因此临床上通过检测血液中 MNs 的含量来辅助诊断嗜铬细胞瘤和副神经节瘤,是《嗜铬细胞瘤和副神经节瘤诊断治疗专家共识(2020版)》《中国继发性高血压临床筛查多学科专家共识(2023)》等专家共识推荐的首选标志物。本方法采用 Anyeep TQ9100液相色谱串联质谱系统,同时检测人血浆中甲氧基肾上腺素、甲氧基去甲肾上腺素和3-甲氧酪胺(3-Methoxytyramine, 3-MT)检测。

仪器与试剂

Anyeep TQ9100超高效液相色谱串联质谱系统

乙腈(质谱纯,美国 Thermo Fisher 公司)

水(超纯水)

甲酸(德国默克公司)

96孔 WCX 固相萃取板(北京曼哈格)

液相条件

流动相A:0.1%甲酸,水

流动相B:乙腈

色谱柱:Phenomenex Kinetex F5 Column 3.0mm×100mm , 2.6 μm

柱温:40 ℃

流速:0.25 mL/min

进样量:20 μL

质谱条件

离子化源: 电喷雾离子化源(ESI+)

源温度: 550 ℃

喷雾电压: 2500 V

气帘气: 20 psi

雾化气: 60 psi

辅助气: 60 psi

碰撞气: 8

扫描模式: MRM

三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺含量(图2)

三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺含量(图3)

样本处理

取待测样本500 μL于1.5 mL EP 管中,加入内标溶液20 μL,涡旋混匀(2500 rpm,30s)。使用 WCX 填料的96孔固相萃取板,先用200 μL水活化,待水流干后,加入上述样本,通过正压萃取装置进行固相萃取。待样本流干后先后加入500 μL水和500 μL乙腈淋洗样本。待淋洗液流干后,加100 μL乙腈(含2%FA)洗脱样本。洗脱液25 ℃氮气吹干10 min,用100 μL复溶液(50%乙腈,含0.1%甲酸)复溶,20 μL进样。

线性范围

三重四极杆液相色谱质谱联用仪-使用Anyeep TQ9100测定人血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺含量(图4)

总结

本方法使用安益谱全自主研发生产的 TQ9100三重四极杆串联质谱系统,实现了血浆中变肾上腺素类物质和3-甲氧酪胺的同时检测,该方法线性好、准确度高、重复性好。