三重四极杆液质联用仪-安益谱TQ9120三重四极杆液质联用仪关于检测水质33种抗生素
一、方法设计与适用范围
目标物选择
本方法选取33种典型抗生素作为检测目标物，涵盖四大类别：磺胺类（磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺间甲氧嘧啶等10种）、喹诺酮类（环丙沙星、恩诺沙星、诺氟沙星等8种）、四环素类（四环素、强力霉素、氧四环素等4种）、大环内酯类及其他（红霉素、罗红霉素、林可霉素、甲氧苄啶等11种）。该类物质在水质中多以ng/L~μg/L级痕量存在，部分组分易与金属离子络合或受微生物降解影响，安益谱TQ9120凭借高灵敏度、快速扫描能力及精准离子对筛选功能，可有效消除基质干扰，实现多组分同时定量。
适用基质与标准依据
适用于地表水、地下水、城市污水处理厂废水及养殖场废水等水体中33种抗生素的定性与定量检测，严格参照HJ 1052-2019《水质 抗生素类药物的测定 液相色谱-三重四极杆质谱法》、HJ 493/494水质采样规范及SL/T788-2019水利行业标准要求，确保检测结果具备合规性与可比性。
二、实验原理
水样经预处理去除颗粒物后，调节pH值并加入螯合剂抑制金属离子干扰，通过HLB固相萃取柱富集净化，实现目标物与基质杂质分离。经反相高效液相色谱柱梯度洗脱分离后，进入电喷雾离子源（ESI）电离，安益谱TQ9120采用多反应监测模式（MRM），通过第一重四极杆（Q1）筛选目标母离子，碰撞室（Q2）将母离子碎裂为特征子离子，第三重四极杆（Q3）特异性检测特征离子对。结合保留时间与离子对丰度比定性，内标法定量，依托仪器±0.1 Da/24h的质量轴稳定性，实现痕量抗生素的精准定量分析。
三、仪器与设备
- 主体仪器：安益谱TQ9120三重四极杆液质联用仪（配备电喷雾离子源ESI、正负离子快速切换模块（切换时间≤50 ms）、自动质量轴校准功能）。
- 色谱柱：C₁₈反相高效液相色谱柱
- 辅助设备：自动固相萃取装置（流速可调节）；氮吹浓缩仪（控温范围30~50℃）；涡旋振荡器；酸度计（精度±0.01 pH）；高速离心机；超低温冰箱；采样箱（带冰袋，样品运输）。
四、实验流程
样品采集与保存
- 采样
- 现场处理
- 保存与运输
样品前处理
- 预处理
- 固相萃取富集净化
- 活化
- 上样
- 洗脱与浓缩
- 复溶与过滤
标准曲线绘制
- 标准储备液配制：
- 单标储备液（100 mg/L）：准确称取33种抗生素标准品各10.0 mg，磺胺类、大环内酯类用甲醇溶解定容至100 mL；喹诺酮类用氢氧化钠-甲醇溶液溶解定容至100 mL；脱水红霉素由红霉素经硫酸酸化转化制备（室温静置4 h）。-10℃以下避光保存，有效期6个月。
- 内标储备液（100 mg/L）：用甲醇溶解8种内标物，定容后-10℃避光保存，有效期6个月。
- 混合标准中间液（1.0 mg/L）：移取适量单标储备液，用甲醇稀释混匀，-10℃避光保存，有效期3个月；内标中间液（1.0 mg/L）同法配制。
- 标准系列配制：用空白水样萃取液（经前处理的无抗生素水样）配制浓度为0.5、2.0、10.0、50.0、200.0 ng/L的标准系列，同时加入内标使用液使各点内标浓度均为10 μg/L，现配现用。
- 曲线绘制：按浓度由低到高进样分析，以目标物浓度与对应内标浓度的比值为横坐标，目标物峰面积与内标峰面积的比值为纵坐标，绘制内标法标准曲线，要求相关系数R²≥0.995。
仪器条件设置
液相色谱条件
质谱条件
样品测定
按照标准系列、空白样品、实际样品的顺序进样分析，每批样品插入1个中间浓度标准品进行质量控制。记录目标物与内标的保留时间、峰面积，通过标准曲线计算水样中33种抗生素的含量，空白样品检测结果需低于方法检出限，中间浓度标准品回收率控制在80%~120%。
五、方法验证结果
线性关系与检出限
33种抗生素在0.5~200.0 ng/L范围内线性关系良好，相关系数R²均≥0.995。以水样体积1000 mL、定容体积1.0 mL、进样量5 μL计算，地表水基质中方法检出限（LOD，S/N=3）为0.4~3.0 ng/L，测定下限（LOQ，S/N=10）为1.7~12 ng/L；污水处理厂废水基质中LOD为0.9~9.3 ng/L，LOQ为3.6~37 ng/L，均满足HJ 1052-2019标准要求。
回收率与精密度
在空白水样中添加低、中、高三个浓度水平（2.0、10.0、50.0 ng/L）的标准品进行加标回收实验，平均回收率为85.2%~112.3%，符合抗生素痕量检测70%~120%的回收率要求。日内精密度（RSD，n=6）≤5.8%，日间精密度（RSD，n=5）≤7.5%，表明方法重复性与稳定性良好。
基质效应
采用空白基质匹配标准曲线结合内标法校正，有效抑制水质基质干扰，33种抗生素的基质抑制率或增强率均控制在±12%以内，确保定量结果准确性。
结论
本方法基于安益谱TQ9120三重四极杆液质联用仪构建，通过优化样品前处理流程、色谱质谱条件及定量方式，实现水质中33种抗生素的同时痕量检测。方法具备检出限低、回收率稳定、精密度良好、基质干扰可控等优势，完全契合HJ 1052-2019等相关标准要求，可广泛应用于环境水质监测、污水处理厂达标评估及养殖废水污染溯源等场景，为抗生素污染防控提供精准可靠的检测数据支撑。
